zKirus病毒規模化(huà)生(shēng)産轉染試劑
2019-03-01
zKirus簡介 zKirus為(wèi)本公司研發的(de)病毒規模化(huà)生(shēng)産專用轉染試劑,以特異的(de)高(gāo)純度陽離子(zǐ)聚合物(wù)為(wèi)主要配方,可用于慢(màn)病毒、反轉錄病毒及反向遺傳學過程的(de)轉染,産生(shēng)高(gāo)滴度病毒。本包裝zKirus體(tǐ)積為(wèi)400µl,正常可用于40個(gè)100mm培養皿的(de)病毒包裝操作(zuò)(反向遺傳學操作(zuò)推薦用60mm培養皿)。
詳細介紹:
操作(zuò)方法 (以100mm培養皿為(wèi)例,其他(tā)請按照(zhào)培養面積等比例調整):
1、 包裝細胞(一般為(wèi)293T或其衍生(shēng)細胞株)轉染前30min-2h換含血清的(de)完全培養基7ml;
2、 取10µl zKirus與0.5ml含雙抗培養基輕柔混勻;
3、 取30µg病毒載體(tǐ)/包裝質粒與0.5ml含雙抗培養基輕柔混勻;
4、 室溫靜置5min;
5、 将2中zKirus溶液加入3中,輕柔吸打混勻;
6、 室溫靜置15-30min;
7、 将1ml轉染混合液輕柔加入包裝細胞中,輕柔混勻;
8、 轉染48-72h收集細胞上(shàng)清,離心棄沉澱,0.45µm濾器(qì)過濾,得到病毒懸液。
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